Les amis qui font des expériences sur les cellules doivent souvent utiliser des méthodes de congélation des cellules. En bref, le stockage congelé des cellules consiste à conserver les cellules dans un environnement à basse température pour atteindre l'objectif de conservation à long terme. Les cellules auront un certain degré de mutation au cours du processus de transmission. Afin de garantir que les cellules puissent encore être utilisées en cas de pollution cellulaire et de mutation, certaines cellules sont généralement utilisées pour la congélation.
Le principe de la congélation cellulaire
L'un des principes du processus de congélation et de récupération des cellules est la "fusion congelée lente" pour préserver au maximum la vitalité des cellules. En termes simples, il doit être lent lorsqu'il est congelé et refroidi, et il doit être chauffé rapidement lorsqu'il est récupéré à basse température. La raison de la congélation lente est que si les cellules sont placées directement dans un environnement à très basse température tel que l'azote liquide, les cellules forment un gros cristal de glace, qui endommagera les cellules.
Si vous le congelez lentement, les cellules peuvent être déshydratées lentement pour atteindre l'objectif de protection des cellules. De plus, lors de la récupération, il s'agit également d'empêcher les petits cristaux de glace de former de gros cristaux de glace, c'est-à-dire les cristaux lourds de cristaux de glace. Par conséquent, lorsque tout le monde fait habituellement des cellules congelées, cela entraîne toujours des pertes de cellules, ce qui est susceptible d'avoir un impact sur l'étape de congélation.
Plusieurs méthodes de congélation cellulaire
Méthode manuelle : Les cellules congelées sont généralement stockées dans de l'azote liquide. La méthode de fonctionnement manuel consiste à refroidir le gradient dans le réfrigérateur. Enregistrez les cellules dans le tube de stockage congelé et placez-les dans un environnement de réfrigérateur de 4 degrés C, -20 degrés C, -80 degrés C dans l'ordre. Congelé pendant 24 heures à -80 degré C avant d'être transféré dans de l'azote liquide. Le refroidissement manuel ne nécessite pas de suppléments supplémentaires d'autres consommables. Il peut être actionné manuellement. C'est le plus simple, mais ce n'est pas simple. L'opération proprement dite est gênante. Et l'effet n'est pas très bon, car cette méthode de refroidissement n'est toujours pas uniforme, et elle n'est pas nécessairement applicable pour des cellules plus fragiles.
Boîte de refroidissement à gradient : La boîte de refroidissement à gradient vendue sur le marché est spécialement utilisée dans le refroidissement uniforme du processus de congélation. La vitesse de refroidissement est généralement de -1 degré/minute. Placez le tube de stockage congelé dans la boîte de refroidissement à gradient et placez la boîte de refroidissement à gradient directement dans l'environnement du réfrigérateur de -80 degré C pour passer la nuit sans opération de gradient manuelle. Abaissez ensuite le tube de dépôt et mettez-le dans l'azote liquide. L'effet de l'utilisation de boîtes de refroidissement à gradient est meilleur, car les boîtes de refroidissement commerciales sur le marché peuvent assurer une vitesse de refroidissement à peu près uniforme.
Il existe deux boîtes de refroidissement à gradient courantes sur le marché. Un besoin d'ajouter de l'isopropyle, généralement un corps de boîtier PC. Lors de l'utilisation, ajouter de l'isopenol à la ligne de mise à l'échelle dans la boîte lors de son utilisation. L'isopropanol est utilisé comme support pour le stockage et la distribution de la chaleur.
Un autre type n'a pas besoin d'être ajouté avec de l'isopropyle, de la mousse et le congélateur peut être placé directement pendant l'utilisation, ce qui est plus pratique à utiliser.
La glacière d'isopropanol est recommandée pour remplacer le liquide après l'avoir utilisé plusieurs fois, mais comme l'isopropanol est un liquide nocif, qui nuit aux expériences et à l'environnement, il peut généralement être utilisé plusieurs fois. Cependant, il est nécessaire de s'assurer que le liquide est dans une certaine quantité.
Stockage congelé non programmé : Utilisez des liquides congelés non programmés qui peuvent être achetés sur le marché. Comparé au liquide congelé traditionnel, le composant interne peut réduire les dommages aux cellules du cristal de glace, de sorte qu'il n'est pas nécessaire d'utiliser le gradient pour refroidir, ni de boîte de refroidissement à gradient. Le stockage congelé peut être placé directement dans un environnement de réfrigérateur de -80 degré C.
De nombreux échantillons de cellules sont très précieux. En plus de nous, nous devons l'utiliser lorsque nous faisons des expériences. Vous devez également choisir autant que possible de bons produits dans la sélection de produits connexes. Sélectionnez le tube de stockage congelé avec une qualité qualifiée, essayez d'utiliser l'outil de refroidissement à gradient pour la congélation et maximisez la garantie de faibles dommages aux cellules pour éviter les petites pertes dues aux mineurs.
